DNA亲子鉴定实验室提取技术

　　DNA多态性检测是当前国内外广泛用于个人识别和亲权鉴定的技术，它包含DNA提取与定量PCR扩增和电泳检测等步骤。

　　法医物证实验室常用的DNA提取方法可分为如下4类:有机溶剂提取法、 Chelex-100提取法、FTA卡纸法、固相提取法(商品化试剂盒如Prepfiler Forensic DNA、IQ、 QIAamp DNA Mini Kit)等。选择何种方法抽提DNA，取决于样本类型、样本量和实验室对目的DNA的质量要求。有机溶剂提取法虽是提取核酸的经典方法，但法医物证实验室已很少使用。目前，对于血斑、唾液斑检材，法医物证实验室常用 Chelex-100提取法或FTA卡纸法。

　　FTA卡纸是一种特殊的纸介质(吸附性的纤维类纸)，它经专利的化学配方(4种化学物质)浸渍，能裂解细胞膜，捕获核酸，并保护核酸不受紫外光的损害和微生物侵蚀，可于室温下收集和保存血样、口腔细胞及组织细胞。对于血液样本，可用FTA标准卡;对于口腔细胞和组织细胞样本，可用指示型FTA卡，这类样本被采集到卡纸上，卡纸的颜色就由粉红色变为白色，因此便于辨认样本的位置。将样本滴加在FTA卡上，待其完全干燥，DNA便吸附于卡纸上。样本中若含有病原体，在FTA卡纸上5s即会失活。使用时，从FTA卡纸上打孔取下一个小圆片(直径1.2m即可)，可直接放入PCR管，用“直接PCR扩增试剂盒”进行DNA分型，或者用FTA纯化试剂洗涤3次，再经TE缓冲液冲洗2次，用普通的PCR扩増试剂盒进行DNA分型。研究表明，FTA卡纸上样本的基因组DNA可在室温下储存14年以上而不降低PCR扩增效率。

　　FTA卡纸法可自动化操作，该法的主要优点在于安全、简便、实用。核酸样本于室温保存，无须冷藏或冻存，便于传递和运输。